Sau những sự kiện xảy ra trong 2 năm của Người Nhện, Peter Parker đang vật lộn để cân bằng cuộc sống của mình với tư cách là một sinh viên đại học và Người Nhện. Anh phải đối mặt với những khó khăn về tài chính, những mâu thuẫn trong tình cảm và những thách thức trong học tập. Vì cái chết của người cha Harry - bạn thân của Peter, mối quan hệ của họ dần trở nên rắc rối. Bên cạnh những mâu thuẫn nội tâm, Peter còn phải đối mặt với một kẻ thù mới nguy hiểm - Giáo sư Otto Octavius, nhà khoa học tài ba nhưng tham vọng của tập đoàn Oscorp.