Danh tính Người Nhện bị Mysterio tiết lộ, khiến cuộc sống của Peter Parker gặp nhiều khó khăn. Anh phải đối mặt với sự soi mói của dư luận, sự nghi ngờ của bạn bè và gia đình, và cả những nguy hiểm rình rập từ những kẻ thù cũ. Trong lúc bế tắc, Peter tìm đến Doctor Strange, hy vọng phép thuật sẽ giúp anh che giấu danh tính và khôi phục lại cuộc sống bình thường. Tuy nhiên, mọi chuyện không hề suôn sẻ như dự tính. Phép thuật của Doctor Strange vô tình mở ra cánh cổng đa vũ trụ, dẫn đến sự xuất hiện của những kẻ thù nguy hiểm từ các vũ trụ khác, bao gồm Green Goblin (Willem Dafoe), Doc Ock (Alfred Molina), Electro (Jamie Foxx), Sandman (Thomas Haden Church) và Lizard (Rhys Ifans).